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霉菌、酵母菌測(ce)試(shi)片檢測(ce)方法

1 適用范圍：本品(pin)可(ke)用(yong)于(yu)各類食品(pin)及飲用(yong)水中(zhong)霉菌和酵母菌的計數。

2 方法原理：將霉菌營養培養基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙片上，通過培養，在酶顯色劑的放大作用下，使霉菌和酵母菌在紙片上顯現出出來，通過計數報告結果。

3方法特點：與傳統方法相比，省去了配制培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作，即開即用，操作簡便。培養時間由一周縮短為48h～72h。

4 操作方法

4.1樣品處理：無菌(jun)稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL無(wu)菌生理(li)鹽水的采樣瓶或均(jun)質杯內，經充分振搖做成1:10的(de)稀釋液，用1mL滅菌吸(xi)管(guan)吸(xi)取(qu)1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌水的試(shi)管內(nei)，用1mL滅菌(jun)吸(xi)管(guan)反復吸(xi)吹50次做(zuo)成(cheng)1:100的稀釋液(ye)，以此類推，每(mei)個稀釋(shi)度(du)更換(huan)一支滅菌吸管。

4.2接種：

4．2．1一般食品選2～3個稀釋度進行檢測，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢測。將檢驗紙片水平放臺面上，揭開上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻加到中央的濾紙片上，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min，每個(ge)稀釋(shi)度(du)接種(zhong)兩片(pian)。

4.2．2用手指先沿方格區邊緣刮一下，防止水外流，然后再在中間輕輕推刮，使水分在紙片方格區內均勻分布，并將氣泡趕走。

4．3培養：將加了樣的檢驗紙片每12片疊放在一起，放入自封袋中，平放在28℃培養箱內培養48h開始觀察計數。

4.4結果判斷與計數：霉菌和酵母菌在紙片上生長后會顯示藍色斑點，霉菌菌落顯示的斑點略大或有點擴散，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養后期全呈現其本身*的顏色。選擇菌落數適中（10～50個）的紙片進行計數，乘以稀釋倍數后即為每克（或毫升）樣品中霉菌和酵母菌的數目。

5 計數原則及報告方式：

5.1 通(tong)常選擇菌落在10～50個(ge)之間的紙片進行計數，乘(cheng)以稀釋倍數報告之。

5.2具體計數原則可參照細菌（菌落）總數的測定方法進行。

6 附加(jia)說明：由于(yu)霉(mei)菌常以孢(bao)子的形式于(yu)空氣(qi)中到處傳播，而多(duo)種(zhong)樣(yang)品(pin)是(shi)要(yao)求(qiu)霉(mei)菌酵母(mu)菌不得撿出，因此檢測霉(mei)菌時需(xu)(xu)特別小心操作，取樣(yang)用(yong)品(pin)、稀釋用(yong)水和吸(xi)管吸(xi)頭(tou)等都需(xu)(xu)仔(zi)細(xi)消(xiao)毒(du)，接種(zhong)時盡量避免(mian)空氣(qi)流動(dong)，動(dong)作要(yao)干(gan)凈利落，每次用(yong)滅(mie)菌生理鹽水接一片空白對照，以免(mian)出現假陽性結果。